 |
نیو کیسل ڈیزیز وائرس RNA (PCR-Fluorescence Probing) کے لیے ڈیٹیکشن کٹ
【پروڈکٹ کا نام】نیو کیسل ڈیزیز وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ
【پیکیج】50 کٹس/باکس
【اشارہ】نیو کیسل ڈیزیز وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ کا اطلاق ایویئن تھروٹ سویب، کلواکا سویب، ٹشو، چکن ایمبریو ایلنٹوک فلوئڈ اور سیل کلچر میں نیو کیسل ڈیزیز وائرس آر این اے کا پتہ لگانے کے لیے ہوتا ہے۔ٹیسٹ کے نتائج صرف تحقیقی مقصد کے لیے ہیں اور طبی تشخیص کے لیے نہیں۔
【اہم اجزاء اور مواد】
نام | تفصیلات | مقدار |
NDV رد عمل کا حل | 1150µl/ٹیوب | 1 |
NDV مثبت کنٹرول | 100µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 100µl/ٹیوب | 1 |
【اسٹوریج اور شیلف لائف】
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا، بار بار جمنا اور پگھلنا ≤ 3 بار، شیلف لائف 12 ماہ ہے۔
【ٹیسٹ کا طریقہ کار】
1۔ نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے کمرشلائزڈ آر این اے ایکسٹرکشن کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر پروردن
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور ہر ٹیوب میں 23µl ری ایکشن سلوشن شامل کریں۔
2.2 مندرجہ بالا PRC ری ایکشن ٹیوبوں میں بالترتیب منفی کنٹرول، مثبت کنٹرول اور نمونوں کا 2µl نیوکلک ایسڈ شامل کریں، کئی سیکنڈ کے لیے 8000rpm پر سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
2.3 پروب ڈیٹیکشن موڈ اس طرح سیٹ کیا گیا ہے: Reporter Dye1: FAM، اور Quencher Dye: NONE۔
2.4 رد عمل کی شرائط درج ذیل ہیں:
55℃ 15 منٹ کے لیے، ایک سائیکل؛ 30s کے لیے 95℃، ایک سائیکل؛ 95℃ برائے 10s → 60℃ برائے 30s (فلوریسنس جمع کریں)، 40 چکر۔فائل کو محفوظ کریں اور اسے چلائیں۔
【نتائج کی تشریح】
1. درج ذیل تقاضوں کو ایک تجربہ میں ایک ہی وقت میں ملایا جائے گا، بصورت دیگر تجربہ غلط ہے اور اسے دہرانے کی ضرورت ہے۔
منفی کنٹرول میں کوئی پروردن وکر نہیں تھا۔
مثبت کنٹرول ایف اے ایم چینل کے ایمپلیفیکیشن وکر میں لاگرتھمک نمو کا ایک اہم مرحلہ تھا، اور ایف اے ایم چینل ایمپلیفیکیشن وکر کی سی ٹی ویلیو ≤ 32 تھی۔
2. اگر ٹیسٹ کے نمونے کے FAM چینل میں کوئی ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہے، تو نمونے کو NDV منفی کے طور پر تعین کیا جا سکتا ہے۔اگر FAM چینل میں لاگرتھمک گروتھ فیز ایمپلیفیکیشن وکر اور Ct قدر ≤ 36 ہے، جس کا تعین NDV مثبت کے طور پر کیا جا سکتا ہے۔36 < Ct قدر < 40 مشکوک نمونے ہیں، جن کی تصدیق کے لیے دوبارہ جانچ کی ضرورت ہے۔
【احتیاطی تدابیر】
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات کے مطابق سختی سے ہوگا۔لیبارٹری کے اہلکاروں کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم کشی کے بعد ڈسپوزایبل کیا جائے گا۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپٹر لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونہ کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کشی والے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد فضلے کے ساتھ پھینک دیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپٹر کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکحل یا الٹرا وائلٹ لیمپ سے کیا گیا۔
【مینوفیکچرنگ】
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، Bandaohuigu انڈسٹریل پارک، Shungeng Road، Zhucheng City، Shandong Province
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810
نیو کیسل ڈیزیز وائرس RNA (PCR-Fluorescence Probing) کے لیے ڈیٹیکشن کٹ
【پروڈکٹ کا نام】نیو کیسل ڈیزیز وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ
【پیکیج】50 کٹس/باکس
【اشارہ】نیو کیسل ڈیزیز وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ کا اطلاق ایویئن تھروٹ سویب، کلواکا سویب، ٹشو، چکن ایمبریو ایلنٹوک فلوئڈ اور سیل کلچر میں نیو کیسل ڈیزیز وائرس آر این اے کا پتہ لگانے کے لیے ہوتا ہے۔ٹیسٹ کے نتائج صرف تحقیقی مقصد کے لیے ہیں اور طبی تشخیص کے لیے نہیں۔
【اہم اجزاء اور مواد】
نام | تفصیلات | مقدار |
NDV رد عمل کا حل | 1150µl/ٹیوب | 1 |
NDV مثبت کنٹرول | 100µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 100µl/ٹیوب | 1 |
【اسٹوریج اور شیلف لائف】
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا، بار بار جمنا اور پگھلنا ≤ 3 بار، شیلف لائف 12 ماہ ہے۔
【ٹیسٹ کا طریقہ کار】
1۔ نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے کمرشلائزڈ آر این اے ایکسٹرکشن کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر پروردن
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور ہر ٹیوب میں 23µl ری ایکشن سلوشن شامل کریں۔
2.2 مندرجہ بالا PRC ری ایکشن ٹیوبوں میں بالترتیب منفی کنٹرول، مثبت کنٹرول اور نمونوں کا 2µl نیوکلک ایسڈ شامل کریں، کئی سیکنڈ کے لیے 8000rpm پر سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
2.3 پروب ڈیٹیکشن موڈ اس طرح سیٹ کیا گیا ہے: Reporter Dye1: FAM، اور Quencher Dye: NONE۔
2.4 رد عمل کی شرائط درج ذیل ہیں:
55℃ 15 منٹ کے لیے، ایک سائیکل؛ 30s کے لیے 95℃، ایک سائیکل؛ 95℃ برائے 10s → 60℃ برائے 30s (فلوریسنس جمع کریں)، 40 چکر۔فائل کو محفوظ کریں اور اسے چلائیں۔
【نتائج کی تشریح】
1. درج ذیل تقاضوں کو ایک تجربہ میں ایک ہی وقت میں ملایا جائے گا، بصورت دیگر تجربہ غلط ہے اور اسے دہرانے کی ضرورت ہے۔
منفی کنٹرول میں کوئی پروردن وکر نہیں تھا۔
مثبت کنٹرول ایف اے ایم چینل کے ایمپلیفیکیشن وکر میں لاگرتھمک نمو کا ایک اہم مرحلہ تھا، اور ایف اے ایم چینل ایمپلیفیکیشن وکر کی سی ٹی ویلیو ≤ 32 تھی۔
2. اگر ٹیسٹ کے نمونے کے FAM چینل میں کوئی ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہے، تو نمونے کو NDV منفی کے طور پر تعین کیا جا سکتا ہے۔اگر FAM چینل میں لاگرتھمک گروتھ فیز ایمپلیفیکیشن وکر اور Ct قدر ≤ 36 ہے، جس کا تعین NDV مثبت کے طور پر کیا جا سکتا ہے۔36 < Ct قدر < 40 مشکوک نمونے ہیں، جن کی تصدیق کے لیے دوبارہ جانچ کی ضرورت ہے۔
【احتیاطی تدابیر】
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات کے مطابق سختی سے ہوگا۔لیبارٹری کے اہلکاروں کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم کشی کے بعد ڈسپوزایبل کیا جائے گا۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپٹر لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونہ کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کشی والے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد فضلے کے ساتھ پھینک دیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپٹر کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکحل یا الٹرا وائلٹ لیمپ سے کیا گیا۔
【مینوفیکچرنگ】
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، Bandaohuigu انڈسٹریل پارک، Shungeng Road، Zhucheng City، Shandong Province
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810
