دستیابی کی حیثیت: | |
---|---|
ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم RNA (PCR-Fluorescence Probing) کے لیے ڈیٹیکشن کٹ
(پروڈکٹ کا نام)ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم RNA (PCR-Fluorescence Probing) کے لیے ڈیٹیکشن کٹ
(پیکیج)50 کٹس/باکس
(اشارہ)ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم RNA (PCR-Fluorescence Probing) کے لیے ڈیٹیکشن کٹ ایویئن تھروٹ سویب، کلوکا سویب، ٹشو، چکن ایمبریو کلچر اور سیل میں ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم RNA کا پتہ لگانے کے لیے لاگو ہوتی ہے۔ٹیسٹ کے نتائج صرف تحقیقی مقصد کے لیے ہیں اور طبی تشخیص کے لیے نہیں۔
(اہم اجزاء اور مواد)
نام | تفصیلات | مقدار |
H5/H7-AVI رد عمل کا حل | 1250µl/ٹیوب | 1 |
H5/H7-AVI مثبت کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
(اسٹوریج اور شیلف لائف)
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا، بار بار منجمد اور پگھلنا ≤ 3 بار، شیلف لائف 12 ماہ ہے۔
(ماڈل)
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus اور دیگر فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر۔
(ٹیسٹ کا طریقہ کار)
1۔ نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے کمرشلائزڈ آر این اے ایکسٹرکشن کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر پروردن
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور ہر ٹیوب میں 25µl ری ایکشن سلوشن شامل کریں۔
2.2 مندرجہ بالا PRC ری ایکشن ٹیوبوں میں بالترتیب منفی کنٹرول کے 5µl نیوکلک ایسڈ، مثبت کنٹرول اور نمونے شامل کریں، کئی سیکنڈ کے لیے 8000rpm پر سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
2.3 ردعمل کی شرائط درج ذیل ہیں:
یمپلیفائر کے متعلقہ پیرامیٹرز | |||
سسٹم | کل حجم: 30µl | ||
سگنل جمع کرنا | ایویئن انفلوئنزا H5/H7 ذیلی قسم | H5 ذیلی قسم - HEX چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |
H7 ذیلی قسم - FAM چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |||
پی سی آر رد عمل کے حالات | اسٹیج | Condition | سائیکل نمبر |
ریورس ٹرانسکرپشن | 55℃: 15 منٹ | 1 | |
Predegeneration | 95℃: 30 سیکنڈ | 1 | |
پی سی آر | 95℃: 10 سیکنڈ | 40 | |
56℃: 30 سیکنڈ (اس مرحلے کے اختتام پر فلوروسینٹ سگنل جمع کرنے کے لیے سیٹ کریں) |
(نتائج کی تشریح)
1. ٹیسٹ کٹ کی تاثیر کا تعین:
(1) کمزور مثبت کنٹرول: FAM اور HEX چینلز کی Ct ویلیو ≤ 32، واضح ایکسپونینشل مرحلے کے ساتھ ایمپلیفیکیشن وکر۔
(2) خالی کنٹرول: FAM اور HEX چینلز میں کوئی ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہوتا ہے، یا ایمپلیفیکیشن وکر سیدھا یا ہلکا ترچھا ہوتا ہے، کوئی اہم ایکسپونیشنل مرحلہ نہیں ہوتا، اور Ct ویلیو ≥ 38 یا کوئی Ct ویلیو نہیں ہوتا ہے۔
2. نتائج کا تعین:
نتیجہ کا فیصلہ | ایف اے ایم چینل | ہیکس چینل |
ایویئن انفلوئنزا وائرس H5 ذیلی قسم نیوکلک ایسڈ مثبت | - | + |
ایویئن انفلوئنزا وائرس H7 ذیلی قسم نیوکلک ایسڈ مثبت | + | - |
ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم نیوکلک ایسڈ مثبت | + | + |
ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم نیوکلک ایسڈ منفی | - | - |
*نوٹ: اگر لوگارتھمک گروتھ فیز ایمپلیفیکیشن وکر اور Ct ویلیو ≤ 36 ہے تو اسے + کے طور پر سمجھا جاتا ہے۔اگر کوئی ایمپلیفیکیشن وکر یا Ct قدر> 36 نہیں ہے، تو اس کا فیصلہ - کے طور پر کیا جائے گا۔نمونے مشتبہ ہیں جب 36 <Ct قدر <40، جس کی دوبارہ جانچ کرنی ہوگی۔
(احتیاطی تدابیر)
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات کے مطابق سختی سے ہوگا۔لیبارٹری کے اہلکاروں کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم کشی کے بعد ڈسپوزایبل کیا جائے گا۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپٹر لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونہ کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کشی والے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد فضلے کے ساتھ پھینک دیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپٹر کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکحل یا الٹرا وایلیٹ لیمپ سے کیا گیا۔
(مینوفیکچرنگ)
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، Bandaohuigu انڈسٹریل پارک، Shungeng Road، Zhucheng City، Shandong Province
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810
ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم RNA (PCR-Fluorescence Probing) کے لیے ڈیٹیکشن کٹ
(پروڈکٹ کا نام)ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم RNA (PCR-Fluorescence Probing) کے لیے ڈیٹیکشن کٹ
(پیکیج)50 کٹس/باکس
(اشارہ)ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم RNA (PCR-Fluorescence Probing) کے لیے ڈیٹیکشن کٹ ایویئن تھروٹ سویب، کلوکا سویب، ٹشو، چکن ایمبریو کلچر اور سیل میں ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم RNA کا پتہ لگانے کے لیے لاگو ہوتی ہے۔ٹیسٹ کے نتائج صرف تحقیقی مقصد کے لیے ہیں اور طبی تشخیص کے لیے نہیں۔
(اہم اجزاء اور مواد)
نام | تفصیلات | مقدار |
H5/H7-AVI رد عمل کا حل | 1250µl/ٹیوب | 1 |
H5/H7-AVI مثبت کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
(اسٹوریج اور شیلف لائف)
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا، بار بار منجمد اور پگھلنا ≤ 3 بار، شیلف لائف 12 ماہ ہے۔
(ماڈل)
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus اور دیگر فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر۔
(ٹیسٹ کا طریقہ کار)
1۔ نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے کمرشلائزڈ آر این اے ایکسٹرکشن کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر پروردن
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور ہر ٹیوب میں 25µl ری ایکشن سلوشن شامل کریں۔
2.2 مندرجہ بالا PRC ری ایکشن ٹیوبوں میں بالترتیب منفی کنٹرول کے 5µl نیوکلک ایسڈ، مثبت کنٹرول اور نمونے شامل کریں، کئی سیکنڈ کے لیے 8000rpm پر سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
2.3 ردعمل کی شرائط درج ذیل ہیں:
یمپلیفائر کے متعلقہ پیرامیٹرز | |||
سسٹم | کل حجم: 30µl | ||
سگنل جمع کرنا | ایویئن انفلوئنزا H5/H7 ذیلی قسم | H5 ذیلی قسم - HEX چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |
H7 ذیلی قسم - FAM چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |||
پی سی آر رد عمل کے حالات | اسٹیج | Condition | سائیکل نمبر |
ریورس ٹرانسکرپشن | 55℃: 15 منٹ | 1 | |
Predegeneration | 95℃: 30 سیکنڈ | 1 | |
پی سی آر | 95℃: 10 سیکنڈ | 40 | |
56℃: 30 سیکنڈ (اس مرحلے کے اختتام پر فلوروسینٹ سگنل جمع کرنے کے لیے سیٹ کریں) |
(نتائج کی تشریح)
1. ٹیسٹ کٹ کی تاثیر کا تعین:
(1) کمزور مثبت کنٹرول: FAM اور HEX چینلز کی Ct ویلیو ≤ 32، واضح ایکسپونینشل مرحلے کے ساتھ ایمپلیفیکیشن وکر۔
(2) خالی کنٹرول: FAM اور HEX چینلز میں کوئی ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہوتا ہے، یا ایمپلیفیکیشن وکر سیدھا یا ہلکا ترچھا ہوتا ہے، کوئی اہم ایکسپونیشنل مرحلہ نہیں ہوتا، اور Ct ویلیو ≥ 38 یا کوئی Ct ویلیو نہیں ہوتا ہے۔
2. نتائج کا تعین:
نتیجہ کا فیصلہ | ایف اے ایم چینل | ہیکس چینل |
ایویئن انفلوئنزا وائرس H5 ذیلی قسم نیوکلک ایسڈ مثبت | - | + |
ایویئن انفلوئنزا وائرس H7 ذیلی قسم نیوکلک ایسڈ مثبت | + | - |
ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم نیوکلک ایسڈ مثبت | + | + |
ایویئن انفلوئنزا وائرس H5/H7 ذیلی قسم نیوکلک ایسڈ منفی | - | - |
*نوٹ: اگر لوگارتھمک گروتھ فیز ایمپلیفیکیشن وکر اور Ct ویلیو ≤ 36 ہے تو اسے + کے طور پر سمجھا جاتا ہے۔اگر کوئی ایمپلیفیکیشن وکر یا Ct قدر> 36 نہیں ہے، تو اس کا فیصلہ - کے طور پر کیا جائے گا۔نمونے مشتبہ ہیں جب 36 <Ct قدر <40، جس کی دوبارہ جانچ کرنی ہوگی۔
(احتیاطی تدابیر)
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات کے مطابق سختی سے ہوگا۔لیبارٹری کے اہلکاروں کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم کشی کے بعد ڈسپوزایبل کیا جائے گا۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپٹر لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونہ کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کشی والے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد فضلے کے ساتھ پھینک دیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپٹر کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکحل یا الٹرا وایلیٹ لیمپ سے کیا گیا۔
(مینوفیکچرنگ)
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، Bandaohuigu انڈسٹریل پارک، Shungeng Road، Zhucheng City، Shandong Province
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810