دستیابی کی حیثیت: | |
---|---|
افریقی سوائن فیور وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ (MGF/CD2V/VP72)
【پروڈکٹ کا نام】
افریقی سوائن فیور وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ (MGF/CD2V/VP72)
【پیکیج】
50 کٹس/باکس
【اہم اجزاء اور مواد】
نام | تفصیلات | مقدار |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) رد عمل کا حل | 1000µl/ٹیوب | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) مثبت کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
【اسٹوریج اور شیلف لائف】
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا۔
,بار بار منجمد اور پگھلنے ≤ 3 بار، شیلف زندگی 12 ماہ ہے.
【ٹیسٹ کا طریقہ کار】
1. نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے کمرشلائزڈ ڈی این اے ایکسٹرکشن کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر پروردن
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور ہر ٹیوب پر 20µl ری ایکشن سلوشن شامل کریں۔
2.2 5µl شامل کریں۔ l منفی کنٹرول کا نیوکلک ایسڈ، مثبت کنٹرول اور نمونے بالترتیب مندرجہ بالا PCR ری ایکشن ٹیوبوں میں، 8000rpm پر کئی سیکنڈ کے لیے سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
2.3 رد عمل کی شرائط درج ذیل ہیں:
یمپلیفائر کے متعلقہ پیرامیٹرز | |||
سسٹم | کل حجم: 30µl | ||
سگنل جمع کرنا
| ASFV (MGF/CD2V/VP72) فلوروسینٹ سگنل
| VP72-FAM چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |
CD2V-VIC/HEX چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |||
MGF-CY5 چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |||
پی سی آر رد عمل کے حالات
| اسٹیج | Condition | سائیکل نمبر |
UNG پروسیسنگ | 37℃: 2 منٹ | 1 | |
Predegeneration | 95℃: 30 سیکنڈ | 1 | |
پی سی آر
| 95℃: 10 سیکنڈ |
40
| |
56℃: 30 سیکنڈ (اس مرحلے کے اختتام پر فلوروسینٹ سگنل جمع کرنے کے لیے سیٹ کریں) |
【نتائج کی تشریح】
1. ٹیسٹ کٹ کی تاثیر کا تعین:
(1) مثبت کنٹرول: FAM، HEX/VIC اور CY5 چینلز کی Ct ویلیو ≤ 32، واضح ایکسپونینشل مرحلے کے ساتھ ایمپلیفیکیشن وکر۔
(2) منفی کنٹرول: FAM، HEX/VIC اور CY5 چینلز میں کوئی ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہوتا ہے، یا ایمپلیفیکیشن وکر سیدھا یا ہلکا ترچھا ہوتا ہے، کوئی اہم ایکسپونیشنل مرحلہ نہیں ہوتا، اور Ct ویلیو ≥ 38 یا کوئی Ct ویلیو نہیں ہوتا ہے۔
2. نتائج کا تعین:
نتیجہ کا فیصلہ | ایف اے ایم چینل | HEX/VIC چینل | CY5 چینل |
VP72 ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | + | - | - |
CD2V ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | - | + | - |
MGF ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | - | - | + |
VP72 اور CD2V ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | + | + | - |
VP72 اور MGF ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | + | - | + |
CD2V اور MGF ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | - | + | + |
MGF، CD2V اور VP72 ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | + | + | + |
MGF، CD2V اور VP72 ASFV نیوکلک ایسڈ منفی | - | - | - |
*نوٹ:
(1) اگر لوگارتھمک گروتھ فیز ایمپلیفیکیشن وکر اور Ct ویلیو ≤ 35 ہے تو اسے + کے طور پر سمجھا جاتا ہے۔اگر کوئی ایمپلیفیکیشن وکر یا Ct قدر> 38 نہیں ہے، تو اس کا فیصلہ - کے طور پر کیا جائے گا۔نمونے مشتبہ ہیں جب 35 <Ct قدر <38، جس کی دوبارہ جانچ کرنا ہوگی۔اگر دوبارہ جانچے گئے نتیجے کی Ct قدر اب بھی 35-38 کے درمیان ہے جس میں واضح لاگاریتھمک ترقی کے مرحلے کے ساتھ، اسے مثبت سمجھا جاتا ہے، بصورت دیگر منفی۔
【احتیاطی تدابیر】
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات کے مطابق ہونا چاہیے۔لیبارٹری کے عملے کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم سے پاک کرنے کے بعد ڈسپوزایبل ہونا چاہیے۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپٹر لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونہ کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کشی والے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد فضلے کے ساتھ پھینک دیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپٹر کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکحل یا الٹرا وائلٹ لیمپ سے کیا گیا۔
【تیار】
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، بنداوہیگو انڈسٹریل پارک، شونگینگ روڈ، زوچینگ سٹی، شان ڈونگ صوبہ
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810
افریقی سوائن فیور وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ (MGF/CD2V/VP72)
【پروڈکٹ کا نام】
افریقی سوائن فیور وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ (MGF/CD2V/VP72)
【پیکیج】
50 کٹس/باکس
【اہم اجزاء اور مواد】
نام | تفصیلات | مقدار |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) رد عمل کا حل | 1000µl/ٹیوب | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) مثبت کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
【اسٹوریج اور شیلف لائف】
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا۔
,بار بار منجمد اور پگھلنے ≤ 3 بار، شیلف زندگی 12 ماہ ہے.
【ٹیسٹ کا طریقہ کار】
1. نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے کمرشلائزڈ ڈی این اے ایکسٹرکشن کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر پروردن
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور ہر ٹیوب پر 20µl ری ایکشن سلوشن شامل کریں۔
2.2 5µl شامل کریں۔ l منفی کنٹرول کا نیوکلک ایسڈ، مثبت کنٹرول اور نمونے بالترتیب مندرجہ بالا PCR ری ایکشن ٹیوبوں میں، 8000rpm پر کئی سیکنڈ کے لیے سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
2.3 رد عمل کی شرائط درج ذیل ہیں:
یمپلیفائر کے متعلقہ پیرامیٹرز | |||
سسٹم | کل حجم: 30µl | ||
سگنل جمع کرنا
| ASFV (MGF/CD2V/VP72) فلوروسینٹ سگنل
| VP72-FAM چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |
CD2V-VIC/HEX چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |||
MGF-CY5 چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |||
پی سی آر رد عمل کے حالات
| اسٹیج | Condition | سائیکل نمبر |
UNG پروسیسنگ | 37℃: 2 منٹ | 1 | |
Predegeneration | 95℃: 30 سیکنڈ | 1 | |
پی سی آر
| 95℃: 10 سیکنڈ |
40
| |
56℃: 30 سیکنڈ (اس مرحلے کے اختتام پر فلوروسینٹ سگنل جمع کرنے کے لیے سیٹ کریں) |
【نتائج کی تشریح】
1. ٹیسٹ کٹ کی تاثیر کا تعین:
(1) مثبت کنٹرول: FAM، HEX/VIC اور CY5 چینلز کی Ct ویلیو ≤ 32، واضح ایکسپونینشل مرحلے کے ساتھ ایمپلیفیکیشن وکر۔
(2) منفی کنٹرول: FAM، HEX/VIC اور CY5 چینلز میں کوئی ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہوتا ہے، یا ایمپلیفیکیشن وکر سیدھا یا ہلکا ترچھا ہوتا ہے، کوئی اہم ایکسپونیشنل مرحلہ نہیں ہوتا، اور Ct ویلیو ≥ 38 یا کوئی Ct ویلیو نہیں ہوتا ہے۔
2. نتائج کا تعین:
نتیجہ کا فیصلہ | ایف اے ایم چینل | HEX/VIC چینل | CY5 چینل |
VP72 ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | + | - | - |
CD2V ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | - | + | - |
MGF ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | - | - | + |
VP72 اور CD2V ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | + | + | - |
VP72 اور MGF ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | + | - | + |
CD2V اور MGF ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | - | + | + |
MGF، CD2V اور VP72 ASFV نیوکلک ایسڈ مثبت | + | + | + |
MGF، CD2V اور VP72 ASFV نیوکلک ایسڈ منفی | - | - | - |
*نوٹ:
(1) اگر لوگارتھمک گروتھ فیز ایمپلیفیکیشن وکر اور Ct ویلیو ≤ 35 ہے تو اسے + کے طور پر سمجھا جاتا ہے۔اگر کوئی ایمپلیفیکیشن وکر یا Ct قدر> 38 نہیں ہے، تو اس کا فیصلہ - کے طور پر کیا جائے گا۔نمونے مشتبہ ہیں جب 35 <Ct قدر <38، جس کی دوبارہ جانچ کرنا ہوگی۔اگر دوبارہ جانچے گئے نتیجے کی Ct قدر اب بھی 35-38 کے درمیان ہے جس میں واضح لاگاریتھمک ترقی کے مرحلے کے ساتھ، اسے مثبت سمجھا جاتا ہے، بصورت دیگر منفی۔
【احتیاطی تدابیر】
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات کے مطابق ہونا چاہیے۔لیبارٹری کے عملے کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم سے پاک کرنے کے بعد ڈسپوزایبل ہونا چاہیے۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپٹر لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونہ کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کشی والے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد فضلے کے ساتھ پھینک دیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپٹر کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکحل یا الٹرا وائلٹ لیمپ سے کیا گیا۔
【تیار】
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، بنداوہیگو انڈسٹریل پارک، شونگینگ روڈ، زوچینگ سٹی، شان ڈونگ صوبہ
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810