پگ کے خون، ٹشو اور سیل کلچر کے نمونوں میں آر وی آر این اے کا پتہ لگانے کے لیے پورسین روٹا وائرس کے لیے ڈیٹیکشن کٹ کا اطلاق ہوتا ہے۔ٹیسٹ کے نتائج صرف تحقیقی مقصد کے لیے ہیں اور طبی تشخیص کے لیے نہیں۔
دستیابی کی حیثیت: | |
---|---|
ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ کے لیے Porcine Rاوٹاوائرس
(پروڈکٹ کا نام) پورسائن روٹا وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ۔
(پیکیج) 50 کٹس/باکس
(اشارہ) پگ کے خون، ٹشو اور سیل کلچر کے نمونوں میں آر وی آر این اے کا پتہ لگانے کے لیے پورسین روٹا وائرس کے لیے ڈیٹیکشن کٹ کا اطلاق ہوتا ہے۔ٹیسٹ کے نتائج صرف تحقیقی مقصد کے لیے ہیں اور طبی تشخیص کے لیے نہیں۔
(اہم اجزاء اور مواد)
نام | تفصیلات | مقدار |
آر وی ری ایکشن حل | 1000µl/ٹیوب | 1 |
آر وی مثبت کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
(اسٹوریج اور شیلف لائف)
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا، 3 بار منجمد اور پگھلنا ≤ بار بار، شیلف لائف 12 ماہ ہے۔
(ٹیسٹ کا طریقہ کار)
1۔ نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے ایک کمرشلائزڈ DNA/RNA نکالنے کی کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر پروردن
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور ہر ٹیوب پر 20µl ری ایکشن سلوشن شامل کریں۔
2.2 مندرجہ بالا PRC ری ایکشن ٹیوبوں میں بالترتیب منفی کنٹرول کے 5µl نیوکلک ایسڈ، مثبت کنٹرول اور نمونے شامل کریں، کئی سیکنڈ کے لیے 8000rpm پر سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
2.3 ردعمل کی شرائط اس طرح مقرر کی جائیں گی:
پرورش کے پیرامیٹرز | |||
سسٹم | کل حجم 25µl ہے۔ | ||
سگنل جمع کرنا | آر وی فلوروسینس سگنل | ROX چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |
پی سی آر کے رد عمل کی شرائط | مرحلہ | شرائط | سائیکل |
UNG عمل | 50 ℃ 5 منٹ کے لیے | 1 | |
پری ڈینیچریشن | 94℃ 30 سیکنڈ کے لیے | 1 | |
پی سی آر | 94℃ 5 سیکنڈ کے لیے |
40 | |
60 ℃ 30 سیکنڈ کے لیے اس مرحلے کے اختتام پر فلوروسینٹ سگنل جمع کرنے کے لیے سیٹ کریں۔ |
[نتائج کی تشریح]
1۔ درستگی کا فیصلہ:
1.1 مثبت کنٹرول: ROX چینل کی Ct ویلیو ≤ 32، اور ایمپلیفیکیشن کریو میں نمایاں اضافہ کا مرحلہ ہے۔
1.2 منفی کنٹرول: ROX چینل میں کوئی ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہے، یا ایمپلیفیکیشن وکر ایک سیدھی لائن یا قدرے ترچھی لائن ہے۔
2. ٹیسٹ کے نتائج کا فیصلہ:
اگر ٹیسٹ کے نمونے کا FAM پتہ لگانے والا چینل ہے۔ کوئی پروردن وکر نہیںکے طور پر مقرر کیا جا سکتا ہے آر وی منفی
اگر ایف اے ایم کا پتہ لگانے والے چینل میں تیزی سے بڑھتا ہوا امپلیفیکیشن وکر ہے اور Ct قدر ہے۔ ≤ 36کے طور پر مقرر کیا جا سکتا ہے آر وی مثبت.
36 نمونے کے طور پر غور کیا جانا چاہئے مشکوک نتائج، اور تجزیہ کو تصدیق کے لیے دہرایا جانا چاہیے۔
[احتیاطی تدابیر]
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات پر سختی سے عمل کرے گا۔لیبارٹری کے اہلکاروں کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم کشی کے بعد ڈسپوزایبل کیا جائے گا۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپیٹ لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونے کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کش کے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد اسے فضلے کے ساتھ ضائع کردیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپیٹ کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکوحل یا الٹرا وائلٹ لیمپ سے کیا جائے گا۔
[مینوفیکچرنگ]
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، Bandaohuigu انڈسٹریل پارک، Shungeng Road، Zhucheng City، Shandong Province
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810
ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ کے لیے Porcine Rاوٹاوائرس
(پروڈکٹ کا نام) پورسائن روٹا وائرس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ۔
(پیکیج) 50 کٹس/باکس
(اشارہ) پگ کے خون، ٹشو اور سیل کلچر کے نمونوں میں آر وی آر این اے کا پتہ لگانے کے لیے پورسین روٹا وائرس کے لیے ڈیٹیکشن کٹ کا اطلاق ہوتا ہے۔ٹیسٹ کے نتائج صرف تحقیقی مقصد کے لیے ہیں اور طبی تشخیص کے لیے نہیں۔
(اہم اجزاء اور مواد)
نام | تفصیلات | مقدار |
آر وی ری ایکشن حل | 1000µl/ٹیوب | 1 |
آر وی مثبت کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 250µl/ٹیوب | 1 |
(اسٹوریج اور شیلف لائف)
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا، 3 بار منجمد اور پگھلنا ≤ بار بار، شیلف لائف 12 ماہ ہے۔
(ٹیسٹ کا طریقہ کار)
1۔ نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے ایک کمرشلائزڈ DNA/RNA نکالنے کی کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر پروردن
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور ہر ٹیوب پر 20µl ری ایکشن سلوشن شامل کریں۔
2.2 مندرجہ بالا PRC ری ایکشن ٹیوبوں میں بالترتیب منفی کنٹرول کے 5µl نیوکلک ایسڈ، مثبت کنٹرول اور نمونے شامل کریں، کئی سیکنڈ کے لیے 8000rpm پر سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
2.3 ردعمل کی شرائط اس طرح مقرر کی جائیں گی:
پرورش کے پیرامیٹرز | |||
سسٹم | کل حجم 25µl ہے۔ | ||
سگنل جمع کرنا | آر وی فلوروسینس سگنل | ROX چینل فلوروسینس سگنل جمع کرتا ہے۔ | |
پی سی آر کے رد عمل کی شرائط | مرحلہ | شرائط | سائیکل |
UNG عمل | 50 ℃ 5 منٹ کے لیے | 1 | |
پری ڈینیچریشن | 94℃ 30 سیکنڈ کے لیے | 1 | |
پی سی آر | 94℃ 5 سیکنڈ کے لیے |
40 | |
60 ℃ 30 سیکنڈ کے لیے اس مرحلے کے اختتام پر فلوروسینٹ سگنل جمع کرنے کے لیے سیٹ کریں۔ |
[نتائج کی تشریح]
1۔ درستگی کا فیصلہ:
1.1 مثبت کنٹرول: ROX چینل کی Ct ویلیو ≤ 32، اور ایمپلیفیکیشن کریو میں نمایاں اضافہ کا مرحلہ ہے۔
1.2 منفی کنٹرول: ROX چینل میں کوئی ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہے، یا ایمپلیفیکیشن وکر ایک سیدھی لائن یا قدرے ترچھی لائن ہے۔
2. ٹیسٹ کے نتائج کا فیصلہ:
اگر ٹیسٹ کے نمونے کا FAM پتہ لگانے والا چینل ہے۔ کوئی پروردن وکر نہیںکے طور پر مقرر کیا جا سکتا ہے آر وی منفی
اگر ایف اے ایم کا پتہ لگانے والے چینل میں تیزی سے بڑھتا ہوا امپلیفیکیشن وکر ہے اور Ct قدر ہے۔ ≤ 36کے طور پر مقرر کیا جا سکتا ہے آر وی مثبت.
36 نمونے کے طور پر غور کیا جانا چاہئے مشکوک نتائج، اور تجزیہ کو تصدیق کے لیے دہرایا جانا چاہیے۔
[احتیاطی تدابیر]
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات پر سختی سے عمل کرے گا۔لیبارٹری کے اہلکاروں کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم کشی کے بعد ڈسپوزایبل کیا جائے گا۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپیٹ لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونے کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کش کے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد اسے فضلے کے ساتھ ضائع کردیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپیٹ کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکوحل یا الٹرا وائلٹ لیمپ سے کیا جائے گا۔
[مینوفیکچرنگ]
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، Bandaohuigu انڈسٹریل پارک، Shungeng Road، Zhucheng City، Shandong Province
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810