دستیابی کی حیثیت: | |
---|---|
مائکوپلاسما بووس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ
【پروڈکٹ کا نام】مائکوپلاسما بووس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ
【پیکیج】50 ٹیسٹ
【اشارہ】Mycoplasma Bovis کے لیے ریئل ٹائم PCR ڈیٹیکشن کٹ ناک کی جھاڑو، دودھ، جوڑوں کے سیال کے نمونوں میں Mycoplasma Bovis RNA کا پتہ لگانے کے لیے لاگو ہوتی ہے۔ٹیسٹ کے نتائج صرف تحقیقی مقصد کے لیے ہیں اور طبی تشخیص کے لیے نہیں۔
【اہم اجزاء اور مواد】
نام | تفصیلات | مقدار |
ایم بی ری ایکشن حل | 1150µl/ٹیوب | 1 |
MB مثبت کنٹرول | 100µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 100µl/ٹیوب | 1 |
【اسٹوریج اور شیلف لائف】
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا، بار بار منجمد اور پگھلنا ≤ 3 بار، شیلف لائف 12 ماہ ہے۔
【ٹیسٹ کا طریقہ کار】
1۔ نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے کمرشلائزڈ آر این اے ایکسٹرکشن کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر ایمپلیفیکیشن (ABI 7500 کی مثال، ABI 7300 اور LC480 کے لیے اس آپریشن اور مینوئل سے رجوع کریں۔)
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور 2 شامل کریں۔ہر ٹیوب پر 0µl سے رد عمل کا حل۔
2.2 مندرجہ بالا PRC ری ایکشن ٹیوبوں میں بالترتیب منفی کنٹرول کے 5µl نیوکلک ایسڈ، مثبت کنٹرول اور نمونے شامل کریں، کئی سیکنڈ کے لیے 8000rpm پر سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
3. qRT-PCR پروردن
3.1 فلوروسینس سگنل چینل: پروب ڈیٹیکشن موڈ اس طرح سیٹ کیا گیا ہے: رپورٹر Dye1: FAM، اور Quencher Dye: NONE۔
3.2 ردعمل کی شرائط اس طرح مقرر کی جائیں گی:
پرورش کے پیرامیٹرز | |||
سسٹم | کل حجم 25µl ہے۔ | ||
پی سی آر کے رد عمل کی شرائط | مرحلہ | شرائط | سائیکل |
UNG عمل | 37℃ 2 منٹ کے لیے | 1 | |
پری ڈینیچریشن | 30 سیکنڈ کے لیے 95℃ | 1 | |
پی سی آر | 95℃ 10 سیکنڈ کے لیے |
40 | |
60 ℃ 30 سیکنڈ کے لیے پر فلوروسینٹ سگنل جمع کرنے کے لیے سیٹ کریں۔ اس مرحلے کے اختتام |
【نتائج کی تشریح】
1۔ درستگی کا فیصلہ:
1.1 مثبت کنٹرول: FAM چینل ≤ 32 کی Ct ویلیو، اور ایمپلیفیکیشن کریو میں ایک نمایاں اضافہ کا مرحلہ ہے۔
1.2 منفی کنٹرول: FAM چینل میں ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہے، یا ایمپلیفیکیشن وکر سیدھی لائن یا معمولی ترچھی لائن ہے۔
2. ٹیسٹ کے نتائج کا فیصلہ:
اگر ٹیسٹ کے نمونے کا FAM پتہ لگانے والا چینل ہے۔ کوئی پروردن وکر نہیں، اس کا تعین کیا جاسکتا ہے۔ MB منفی۔
اگر ایف اے ایم کا پتہ لگانے والے چینل میں تیزی سے بڑھتا ہوا امپلیفیکیشن وکر ہے اور Ct قدر ہے۔ ≤ 36، اس کا تعین کیا جاسکتا ہے۔ MB مثبت.
36 نمونے کے طور پر غور کیا جانا چاہئے مشکوک نتائج، اور تجزیہ کو تصدیق کے لیے دہرایا جانا چاہیے۔
【احتیاطی تدابیر】
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات کے مطابق سختی سے ہوگا۔لیبارٹری کے اہلکاروں کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم کشی کے بعد ڈسپوزایبل کیا جائے گا۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپٹر لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونہ کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کشی والے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد فضلے کے ساتھ پھینک دیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپٹر کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکحل یا الٹرا وائلٹ لیمپ سے کیا جائے گا۔
【مینوفیکچرنگ】
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، Bandaohuigu انڈسٹریل پارک، Shungeng Road، Zhucheng City، Shandong Province
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810
مائکوپلاسما بووس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ
【پروڈکٹ کا نام】مائکوپلاسما بووس کے لیے ریئل ٹائم پی سی آر ڈیٹیکشن کٹ
【پیکیج】50 ٹیسٹ
【اشارہ】Mycoplasma Bovis کے لیے ریئل ٹائم PCR ڈیٹیکشن کٹ ناک کی جھاڑو، دودھ، جوڑوں کے سیال کے نمونوں میں Mycoplasma Bovis RNA کا پتہ لگانے کے لیے لاگو ہوتی ہے۔ٹیسٹ کے نتائج صرف تحقیقی مقصد کے لیے ہیں اور طبی تشخیص کے لیے نہیں۔
【اہم اجزاء اور مواد】
نام | تفصیلات | مقدار |
ایم بی ری ایکشن حل | 1150µl/ٹیوب | 1 |
MB مثبت کنٹرول | 100µl/ٹیوب | 1 |
منفی کنٹرول | 100µl/ٹیوب | 1 |
【اسٹوریج اور شیلف لائف】
-20±5℃ پر ذخیرہ کیا گیا، بار بار منجمد اور پگھلنا ≤ 3 بار، شیلف لائف 12 ماہ ہے۔
【ٹیسٹ کا طریقہ کار】
1۔ نیوکلک ایسڈ نکالنا
نیوکلک ایسڈ نکالنے کے لیے کمرشلائزڈ آر این اے ایکسٹرکشن کٹ کی جا سکتی ہے، براہ کرم کٹ کی ہدایات پر عمل کریں۔
2. پی سی آر ایمپلیفیکیشن (ABI 7500 کی مثال، ABI 7300 اور LC480 کے لیے اس آپریشن اور مینوئل سے رجوع کریں۔)
2.1 ٹیسٹ کے نمونوں کی تعداد کا حساب لگائیں، n+2 PCR ری ایکشن ٹیوب لیں، اور 2 شامل کریں۔ہر ٹیوب پر 0µl سے رد عمل کا حل۔
2.2 مندرجہ بالا PRC ری ایکشن ٹیوبوں میں بالترتیب منفی کنٹرول کے 5µl نیوکلک ایسڈ، مثبت کنٹرول اور نمونے شامل کریں، کئی سیکنڈ کے لیے 8000rpm پر سینٹری فیوج کریں، اور انہیں فلوروسینٹ مقداری PCR یمپلیفائر میں ڈالیں۔
3. qRT-PCR پروردن
3.1 فلوروسینس سگنل چینل: پروب ڈیٹیکشن موڈ اس طرح سیٹ کیا گیا ہے: رپورٹر Dye1: FAM، اور Quencher Dye: NONE۔
3.2 ردعمل کی شرائط اس طرح مقرر کی جائیں گی:
پرورش کے پیرامیٹرز | |||
سسٹم | کل حجم 25µl ہے۔ | ||
پی سی آر کے رد عمل کی شرائط | مرحلہ | شرائط | سائیکل |
UNG عمل | 37℃ 2 منٹ کے لیے | 1 | |
پری ڈینیچریشن | 30 سیکنڈ کے لیے 95℃ | 1 | |
پی سی آر | 95℃ 10 سیکنڈ کے لیے |
40 | |
60 ℃ 30 سیکنڈ کے لیے پر فلوروسینٹ سگنل جمع کرنے کے لیے سیٹ کریں۔ اس مرحلے کے اختتام |
【نتائج کی تشریح】
1۔ درستگی کا فیصلہ:
1.1 مثبت کنٹرول: FAM چینل ≤ 32 کی Ct ویلیو، اور ایمپلیفیکیشن کریو میں ایک نمایاں اضافہ کا مرحلہ ہے۔
1.2 منفی کنٹرول: FAM چینل میں ایمپلیفیکیشن وکر نہیں ہے، یا ایمپلیفیکیشن وکر سیدھی لائن یا معمولی ترچھی لائن ہے۔
2. ٹیسٹ کے نتائج کا فیصلہ:
اگر ٹیسٹ کے نمونے کا FAM پتہ لگانے والا چینل ہے۔ کوئی پروردن وکر نہیں، اس کا تعین کیا جاسکتا ہے۔ MB منفی۔
اگر ایف اے ایم کا پتہ لگانے والے چینل میں تیزی سے بڑھتا ہوا امپلیفیکیشن وکر ہے اور Ct قدر ہے۔ ≤ 36، اس کا تعین کیا جاسکتا ہے۔ MB مثبت.
36 نمونے کے طور پر غور کیا جانا چاہئے مشکوک نتائج، اور تجزیہ کو تصدیق کے لیے دہرایا جانا چاہیے۔
【احتیاطی تدابیر】
1. لیبارٹری کا انتظام پی سی آر جین ایمپلیفیکیشن لیبارٹری کے انتظامی تصریحات کے مطابق سختی سے ہوگا۔لیبارٹری کے اہلکاروں کو پیشہ ورانہ تربیت دی جانی چاہیے۔تجرباتی عمل کو مختلف علاقوں میں سختی سے انجام دیا جائے گا (ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ کی تیاری کا علاقہ، امپلیفیکیشن اور مصنوعات کے تجزیہ کا علاقہ)۔تمام استعمال کی اشیاء کو جراثیم کشی کے بعد ڈسپوزایبل کیا جائے گا۔تجرباتی آپریشن کے ہر مرحلے پر خصوصی آلات، سازوسامان اور سامان کو ایک دوسرے سے استعمال نہیں کیا جائے گا۔
2. براہ کرم ری ایجنٹ اور نمونہ کی تیاری کے مرحلے کے لیے حیاتیاتی حفاظتی کابینہ تیار کریں۔تجربہ کے دوران لیب کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور پائپٹر لگائے جائیں گے۔
3. جہاں تک ممکن ہو ری ایجنٹس کے بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کیا جائے۔استعمال کرنے سے پہلے، ری ایجنٹس کو مکمل طور پر پگھلا کر 8000rpm پر کئی سیکنڈ تک سینٹری فیوج کیا جانا چاہیے۔
4. براہ کرم نمونہ کی تیاری کے علاقے میں استعمال ہونے والے پپیٹ کو جراثیم کشی والے کنٹینر میں ڈالیں اور جراثیم کشی کے بعد فضلے کے ساتھ پھینک دیں۔
5. تجربے کے بعد، ورک ٹیبل اور پائپٹر کا علاج 10% ہائپوکلورائٹ یا 75% الکحل یا الٹرا وائلٹ لیمپ سے کیا جائے گا۔
【مینوفیکچرنگ】
نام: شانڈونگ زنڈا جین ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ
Shandong Sinder Technology Co., Ltd کا ذیلی ادارہ
پتہ: بلڈنگ B2، Bandaohuigu انڈسٹریل پارک، Shungeng Road، Zhucheng City، Shandong Province
پوسٹ کوڈ: 262233
فون: +86 - 0532 5882 0810
مواد خالی ہے!